在分子生物學、臨床研究與精準醫療逐漸深入發展的今天,實時熒光定量PCR(qPCR)技術已成為核酸檢測、表達分析及基因變異研究的關鍵方法。Applied Biosystems 7500 系列,作為賽默飛旗下廣受歡迎的實時熒光定量PCR平臺,憑借其高穩定性、良好通量、靈活的軟件平臺和出色的數據一致性,被全球眾多實驗室廣泛采用。
7500系列包括兩種機型:標準版7500與7500 Fast型,分別面向常規通量與快速檢測需求,適用于多種樣本類型及實驗場景,兼容多種熒光探針與反應體系,是研究與診斷之間的重要橋梁。
Applied Biosystems 7500 系列基于傳統96孔反應板設計,支持標準0.2 mL孔板或八聯管。整機設計緊湊,集成光學檢測與溫控模塊,操作界面直觀,硬件結構設計合理。
96孔熱循環模塊(標準或Fast)
精密溫控系統(Peltier固態冷卻)
五通道光學檢測系統
Windows操作平臺連接的軟件系統
通用PCR塑料耗材適配架
外接PC與軟件控制界面
通過結構模塊化設計,設備實現了快速升降溫、精準熒光檢測與靈活數據分析的高度整合。
升溫速率為2.5°C/秒;
完整反應周期約需2小時;
適合對速度要求不高但對數據質量要求較高的應用;
多用于常規基因表達、微生物檢測、SNP分型等科研任務。
升溫速率提升至5°C/秒;
全程反應時間可縮短至30-40分鐘;
適合時間敏感實驗如臨床樣本快速篩查、病原快速診斷等;
支持Fast反應耗材與Fast反應試劑,需專門適配。
兩款設備在光學系統、數據分析能力和軟件平臺方面保持一致,均支持多重檢測及標準定量分析。
7500系列均配備5通道光學檢測系統,采用獨立激發濾光片與發射濾光片組合,分別對應多種常見熒光染料:
支持FAM、VIC、SYBR Green、ROX、TAMRA、NED、Cy5等染料;
通道之間無交叉干擾,適合多重熒光反應;
光源為高亮度氙燈,配合高靈敏CCD攝像頭捕捉信號;
每個通道設定獨立校準值,確保反應線性范圍廣(10個數量級以上);
最低檢測靈敏度可達1-10個拷貝/μL。
系統經過嚴格的工廠預校準,保證設備到達即用,無需額外光路調整。
高精度溫控是PCR反應成敗的關鍵。7500系列的熱循環模塊采用高導熱Peltier熱電元件,實現快速升降溫與精準溫度控制:
溫度精度 ±0.25°C;
熱蓋自動壓力調節,適配不同耗材;
支持梯度設計,便于引物退火溫度優化;
均一性良好,邊緣效應極低,實驗重復性高。
Fast型號更在標準基礎上優化加熱算法與模塊材料,提高整體實驗通量與響應速度。
賽默飛為7500系列配套開發了功能全面的分析軟件(7500 System SDS Software),適用于Windows環境,支持多種實驗模式與分析方式:
實時數據監控:可實時查看熒光曲線、熔解曲線與擴增效率;
Ct值分析:系統自動設定閾值或允許手動調整;
標準曲線功能:支持絕對定量、拷貝數分析;
相對定量分析:ΔCt、ΔΔCt方法一鍵完成;
SNP分型與HRM分析:支持TaqMan MGB探針及高分辨熔解曲線模塊(升級后支持);
圖表報告導出:可生成PDF、Excel格式報告,便于歸檔與發表。
軟件支持模板文件建立與實驗復制,減少重復設定操作時間,提高數據一致性。
7500 / 7500 Fast 系統支持多種分子實驗,尤其適合中等通量下對結果穩定性要求較高的任務:
通過SYBR Green法或TaqMan探針體系實現目標基因表達量變化分析,適合研究藥物調控、應激響應與轉錄機制。
快速識別細菌、病毒或真菌核酸序列,特別適用于病原體快速篩查、傳染病流行追蹤及臨床預警。
配合商業探針或自定義引物,可實現EGFR、KRAS、BRAF等突變熱點位點分析,為個性化治療提供依據。
進行CNV(Copy Number Variation)分析、SNP分型與基因型篩查,適用于遺傳疾病、胚胎檢測及家族病譜分析。
對轉基因作物、食品添加劑、環境樣品中生物污染進行靈敏檢測,是食品安全及生態監測領域的得力工具。
保持20-25bp長度,GC含量在45%-60%;
回避二聚體與發夾結構;
探針置于引物之間,避免重疊;
建議使用TaqMan或MGB修飾探針以提高特異性。
使用原廠推薦的0.2 mL光學板或8聯管;
使用ROX作為被動參比染料(系統自動校正);
建議使用Fast試劑體系時選擇Fast熱循環程序;
| 步驟 | 溫度 | 時間 |
|---|---|---|
| 初始變性 | 95°C | 10分鐘 |
| 變性 | 95°C | 15秒 |
| 退火/延伸 | 60°C | 60秒 |
| 循環次數 | — | 40次 |
Fast反應條件下退火/延伸可縮短至30秒以內。
設定NTC對照、陽性對照和標準曲線;
使用融解曲線分析檢測非特異擴增;
引入參考基因進行標準化;
檢查擴增效率是否在90%-110%范圍內。
7500系列設備在全球實驗室中經受多年考驗,以高穩定性、可重復性與維護友好著稱:
每臺設備出廠前通過嚴格光學與溫控測試;
具備長時間運行穩定性,適合連續樣本處理;
提供完善的本地化技術支持、校準服務與用戶培訓;
軟件定期更新,確保兼容性與數據安全;
可選購校準套件、探針試劑及Fast模塊升級組件。
Applied Biosystems 7500 / 7500 Fast 實時熒光定量PCR系統憑借其高質量的光學模塊、穩定的熱循環系統、兼容多種應用需求的軟件平臺以及良好的用戶體驗,成為中高通量實驗室及研究單位理想的qPCR解決方案。
無論是在基因功能研究、臨床分子檢測,還是在環境與食品安全領域,7500系列以其靈活性和可靠性為基礎研究與轉化醫學提供了堅實保障。其在科研與臨床之間的橋梁作用,也使其成為高校、醫院與生物技術公司信賴的核心平臺之一。
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